这是我发的第二个版面，刚才不知道应该发在哪个版面，就写在草根里了，后来搜了一下讨论牛肉的事情这里也有，就复制过来，想让更多的人科学的理解这个事情。对于前段时间发生的牛肉鉴定的事情，我希望以客观的、科学的角度告诉大家事实。
论坛上不停的有人提出关于牛肉鉴定费用应该李女士出还是老牛出，好像成一边倒形式都说要让李女士出钱，可是对于懂得专业知识的人来说，为什么不能让鉴定的单位免费鉴定呢？他们所谓的鉴定费要2800，纯属暴利。我可以负责的告诉大家，像这样的鉴定，既没有测序，也没有后期的分析，只是一个单纯的提取DNA和电泳检测，价格少个零的成本足以！ 我就奇怪那个鉴定单位怎么有胆量叫出2800元。而且我要指出，即使是亲子鉴定，现在也不需要2800/人，我上次问了相关人事，现在做一般都在1800-2200左右的，当然这个是题外话，我这里不是说这个的。下面我会根据那个新闻一一解说的，当时我看到这个报道，就觉得写的不行，如果说记者同志是外行，这些稿子是经过那个鉴定公司的专业人员审核过的，我只能说，这人的解释能力以及专业能力不怎么样。大众的确不需要了解的很深入很透彻，但是我们不能把一些东西错误传达，给公众造成误导。 红字是报道中的部分，黑色为我的解释部分
实验共分三个步骤。
第一步DNA提取
1.样品分别用刀片切碎，1.5ml离心管中加入约100mg样品，加600μlDNA提取溶液(pH8.0)旋涡混匀，加入5μl10mg/ml蛋白酶K，56℃水浴60min；5μl10mg/ml蛋白酶K 这个不知道是怎么写出来的，根本是错误的表达。其实它的意思为加入5μl蛋白酶K（酶的浓度是10mg/ml），像那样子的写法，如果是实验人员教你的，那他是个新手，怎么会犯这样的错误，根本不能那么写的。 这里我来解释一下，μl这个单位是生化上常用的体积单位，MM们经常会收到化妆品小样一般是1ml或2ml,这个1μl就是1ml的1/1000，所以是及其微量的。水浴锅在高中做实验的时候应该见过吧，它这里说的水浴也就是把实验材料放入水浴锅里，温度保持恒定56度。
2. 12000g离心5min，取上清转移到新的1.5ml管子中；上一步骤写的是1.5ml离心管，这一步就该一致，怎么就成“管子”了，这个是记者用词粗心大意。
3.加600μl酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)剧烈振荡，12000g离心10min；离心是指把样品放入特定的仪器叫离心机，它能高速围绕轴心旋转，达到将样品的细胞壁碎片或者杂质沉淀下来，使得液相分离。“12000g离心”怎么连个单位都没有，其实应该是12000g/分钟
4. ……
这些步骤共6个程序，要花去两个多小时。通俗的解释是：
先是把上面的三种肉用小刀切成末，各取两个大米那么大的小块，放在大约有一粒花生米那么多的溶液里（这就是约600μl），加进去蛋白酶，放在56℃的温水里泡一小时，再放在每分钟12000转的离心机上拼命转，肉里的DNA连溶解带甩地就出来了（这句话如果是实验人员说的，那他说错了，而且写的让人看不懂。加入了蛋白酶以后，肉纤维开始松散解体后，用高速离心的方法，可以将那些纤维、细胞壁以及杂质等和DNA分离，DNA本来就溶于水的，不用被甩出来。而是存在于液相中，从组织里分离。），再加溶液，再甩……反复好几次，最后就得到比较纯的DNA水溶液了。
第二步牛、猪源性成分P C R检测
PCR反应体系10buffer(含Mg2+)2.5μl，（请问10buffer是记者漏写了东西吧？应该是10*buffer。就是说这个是高浓度的，普通的试剂如果在配的时候我们把浓度升高一倍，就叫做2*，如果是10*，就是配成10倍浓度）dNTP终浓度100μM，引物niuU、niuL(zhuU、zhuL)（这4条引物其实是两对，即niuU、niuL是检测牛肉的一对引物，zhuU、zhuL是检测猪肉的一对引物）的终浓度均为0.2mol/L 模板DNA为1μl……94变性30s 58℃退火30s 72℃延伸30s32个循环， 72℃延伸5min……（这是一个PCR反应的温度和时间的条件，大家不必深究，我们都是直接在仪器上设置好条件后，就让它反应，一般1.5-2小时结束，当中不用去管着仪器的）
这一步其实就是为了证明刚才提出的DNA是好的，能用。（这一步可以是证明引物是好的，意思是以上引物是能够用来鉴定牛肉或者猪肉的。也可以说明牛肉/猪肉DNA是提出来了可用的）
用的是电泳的方法——电泳就是在带电环境下，让DNA游泳。
DNA是一种核酸，核酸是带负电的，两边接上电极，（给谁接上电极？这句话写的不对的，DNA、RNA都带负电，它们得在电泳槽里有缓冲液存在的情况下电泳才会从负极往正极跑，电泳槽就是充满缓冲液体，两头接电极的仪器。按照记者的说法，好像是给核酸直接接电极，很严重的错误。）它就会朝正极游过去。在规定时间里，块头大就游得慢，块头小就游得快。（这里写的很容易让大众误解，什么叫块头大块头小，人家会说是牛肉块头大还是猪肉块头大？这里其实是指，刚才做好的PCR产物，产物是有长有短的，就像棉线，你可以剪一段长的，或者剪短一点的，当然DNA是很微观的，我这里是用棉线大概说明了PCR产物的样子。产物越长，在电泳过程中受到的阻力越大，所以比短一点的跑的慢）正常的DNA，一定时间会游到哪里，是有科学依据的。游得太快接近负极的，说明块头太小，块头小说明DNA片断已经分解了，比较碎，就不能用了。
金博士说，比如有些凶杀案，尸体腐败得太厉害，DNA就做不成，（什么叫DNA做不成？是DNA被降解了）因为已经被微生物分解了。
第三步PCR产物的检测
取4μlPCR产物在1.2%琼脂糖凝胶和1XTAE缓冲液中电泳10min(200V)后,在凝胶成像系统中观察并拍照记录……
这一步的说明最少，但最难理解。金博士昨天花了一个多小时跟我解释，大概意思是分两步：
一把上面提取的三种DNA，放在一个预先定制的溶液里，这里面充满了牛的DNA单链片段。在一定的温度条件下，牛肉DNA，就会在这种环境里成几何倍地复制、扩增，扩到一定数目，就能电泳，在紫外灯照射下，能看到它们游到了一个特定的地方；而猪肉DNA，无法和牛DNA的单链配对，所以也没办法复制，它在电泳时就不会有任何表现。
然后，在充满猪的DNA单链片段的溶液里，牛的DNA也无法复制，所以也不会有任何表现。（这两段话的意思是只有真正牛肉DNA才能被引物niuU、niuL识别出来，从而扩增出产物，而猪肉的是扩增不出来的。就是说种瓜得瓜，种豆得豆）
报道也需要严谨，希望记者同志下次能仔细检查稿子，大众不了解不代表可以误导大众。
还有一点我想说的是，这个鉴定的成本不会超过200块的，即使是要收费，这家单位也不能这样多收收人家的辛苦钱！你倒好，做了广告还赚黑心钱，太过分了。我说的都是事实，如果大家有疑问可以跟帖 我看到了会回复的。
离心速度。